淡豆豉作为一味传统中药，其质量标准随着科技发展而不断完善。2025版《中国药典》对淡豆豉的含量测定提出了新的要求，本文基于好色先生TV免费版EClassical 3200高效液相色谱系统和Supersil ODS2色谱柱，介绍2025版《中国药典》淡豆豉中活性成分的测定方法，并对比分析2025版药典的主要变化。

1、淡豆豉的药物作用概述

淡豆豉为豆科植物大豆的成熟种子经发酵加工而成的制品，其性味苦、辛、凉，归肺、胃经，具有解表、除烦、宣发郁热的功效。临床上主要用于治疗感冒、寒热头痛、烦躁胸闷、虚烦不眠等症。现代药理研究表明，淡豆豉中的主要活性成分为大豆苷元和染料木素，二者均属于异黄酮类化合物。这些成分具有解热、镇静神经的作用，与淡豆豉传统功效中的“治疗虚烦不眠”相吻合。此外，研究还发现这些成分具有一定的抗氧化和调节内分泌功能。

                                              大豆苷元                                    染料木素

2、2025版与2020版《中国药典》淡豆豉标准的主要变化

2025版《中国药典》在淡豆豉的质量标准上进行了重要修订，其中显著的变化是含量测定限度的提高。

含量限度大幅提升：2025版药典规定，淡豆豉中大豆苷元和染料木素的总量不得少于0.10%，而2020版药典的限度为不得少于0.040%，标准提高了2.5倍。这一变化反映了对淡豆豉药材质量要求的显著提高。

检测方法更加严谨：新版药典在系统适用性试验中明确要求，理论板数按大豆苷元峰和染料木素峰计算均不低于5000，确保色谱分离效果满足定量分析要求。

安全性控制加强：2025版药典在中药方面系统性加强了对禁用农药、重金属及有害元素等外源性有害物质的限量控制，这些变化同样适用于淡豆豉的标准。

3、淡豆豉中大豆苷元与染料木素的HPLC测定方法

1、色谱条件色谱系统：EClassical 3200系统配D3230二极管阵列检测器；

色谱柱：Supersil ODS2 (ID 4.6 mm×250 mm，5 µm，订货号31113004)；

流动相：乙腈/1%冰醋酸水溶液 = 25/75 (V/V)；

流速：1.0 mL/min；

检测波长：260 nm；

柱温：35℃；

进样量：10 µL；

1、色谱条件色谱系统：

EClassical 3200系统配D3230二极管阵列检测器；色谱柱：Supersil ODS2 (ID 4.6 mm×250 mm，5 µm，订货号31113004)；流动相：乙腈/1%冰醋酸水溶液 = 25/75 (V/V)；流速：1.0 mL/min；检测波长：260 nm；柱温：35℃；进样量：10 µL；

2、系统适用性要求

理论板数按大豆苷元峰和染料木素峰计算均不低于5000。

3、对照品溶液制备

精密称取大豆苷元、染料木素对照品各10 mg，分别置于10 mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为储备液。分别精密量取上述储备液各1mL，置于同一50 mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，制成每1 mL各含20 µg的混合对照品溶液。

4、供试品溶液制备

取淡豆豉粉末(过二号筛)约1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25 mL，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

5、测定方法与限度要求

分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 µL，注入好色先生TV网站APP在线观看，测定记录色谱图，按外标法以峰面积计算大豆苷元和染料木素的含量。

2025版药典限度要求：按干燥品计算，淡豆豉中含大豆苷元和染料木素的总量不得少于0.10%。

4、实验结果与分析

1、色谱分离使用Supersil ODS2色谱柱进行分析，淡豆豉供试品溶液的色谱图如下：

图1. 淡豆豉供试品溶液在Supersil ODS2色谱柱上的分离色谱图

色谱峰，1-大豆苷元，2-杂质1，3-杂质2，4-染料木素

从图1可见，在该色谱条件下，大豆苷元(保留时间15.150 min)与染料木素(保留时间35.541 min)得到良好分离，且与相邻杂质峰完全分开。系统适用性参数显示，大豆苷元峰的塔板数为13233，拖尾因子为0.985；染料木素峰的塔板数为13246，拖尾因子为0.978，均符合药典要求。

2、色谱柱的选择

为选择合适的色谱柱，实验对比了六种不同色谱柱对淡豆豉供试品的分离效果，关键分离参数如表1所示：

表1. 不同色谱柱对淡豆豉供试品的分离效果对比

从表1可以看出，测试的6种色谱柱都能分离出大豆苷元（峰1）和染料木素（峰4），但在好色先生TV免费版Supersil ODS2和SinoChrom ODS-AP色谱柱上能够分离出2个杂质峰（峰2和峰3），而在在其它色谱柱上仅分离出一个杂质峰，这充分显示出在药典规定的色谱条件下，它们对淡豆豉供试品有着优异的分离能力。因此，选择Supersil ODS2和SinoChrom ODS-AP更有利于药品质控。但二者相比，使用Supersil ODS2色谱柱能使大豆苷元与杂质更好地分离。另外，各被测组分在Supersil ODS2色谱柱上的峰形对称性良好（拖尾因子接近1.0），柱效高（塔板数均超过13000），完全满足2025版《中国药典》对淡豆豉含量测定的要求。

3、实验结论

本实验验证了使用好色先生TV免费版EClassical 3200 HPLC系统结合Supersil ODS2色谱柱完全能够满足2025版《中国药典》对淡豆豉含量测定的要求。该方法具有以下优点：

分离效果优异：大豆苷元、染料木素及相邻杂质峰均得到基线分离，无干扰。

分析时间合理：完整分析时间约40分钟，适合常规质量控制。

系统适用性良好：理论板数、拖尾因子等参数均符合药典要求。

方法专属性强：通过二极管阵列检测器可以进一步验证峰的纯度。

5、总结

2025版《中国药典》大幅提高了淡豆豉的质量标准，特别是将大豆苷元和染料木素的总量限度从0.040%提高至0.10%，这对分析方法的准确性和可靠性提出了更高要求。本文建立的基于好色先生TV免费版EClassical 3200 HPLC系统的分析方法，采用Supersil ODS2色谱柱，以乙腈-1%冰醋酸水溶液(25:75)为流动相，在260nm检测波长下，能够有效分离并准确定量淡豆豉中的大豆苷元和染料木素。通过对比六种不同色谱柱的分离效果，证实了色谱柱选择对淡豆豉分析方法的重要性，其中Supersil ODS2色谱柱表现出佳的分离性能。该方法准确可靠，重复性好，完全满足2025版《中国药典》对淡豆豉含量测定的要求，可为淡豆豉的质量控制提供有力的技术支撑。