当污染来自仪器内部，你的每一步清洗都至关重要。

通过前三期的排查，如果已确认污染来自仪器系统内部，那么真正的挑战才开始。仪器内部的污染更为隐蔽和顽固，需要系统性的深度清洗。本期将直击核心，带你逐一攻克色谱柱、流路与检测器这三大内部污染重灾区。

排查总纲：由表及里，循序渐进

处理系统内部污染，必须遵循科学的顺序，建议遵循以下流程图所示的路径，效率高：

第一步：色谱柱污染排查与清洗

色谱柱是污染物容易滞留并缓慢释放的部位。

污染类型判断：

残留污染：前次样品中强保留组分未完全洗脱。

固定相流失/污染：填料降解或被不可逆吸附的杂质污染。

排查与清洗操作：

1.  初步冲洗判断：连续进样5-10针强溶剂（如高比例甲醇），观察目标鬼峰的峰面积是否逐针减小。若减小，则很可能是残留污染，持续冲洗可能解决。

2.  强力清洗程序：参考您购买的色谱柱使用说明中的深度清洗程序进行清洗。

3.  终验证：执行一次系统空白（空针）测试。若鬼峰依然存在且未见减弱，则基本可排除色谱柱是唯一污染源，需进入下一步排查。

防患于未然：

如何保护您昂贵的色谱柱？完成上述深度清洗后，如何避免分析柱再次成为污染“重灾区”？有效且经济的方法是：在分析柱前加装一支保护柱。它如同色谱系统的“前置过滤器”，能主动截留样品基质和流动相中的强保留杂质、颗粒物，防止其进入并污染核心的分析柱。

好色先生TV免费版保护柱核心价值：

将保护柱纳入日常分析流程，是从根本上降低维护频率、确保数据重现性的明智选择。

第二步：枢纽地带——进样阀与流路清洗

进样阀的定量环、针座、流路切换阀是污染物交叉吸附和滋生的温床。

关键清洗操作：

1.  手动冲洗进样阀：

将进样阀置于“Load”和“Inject”位置，分别使用注射器吸取纯甲醇或异丙醇，反复冲洗样品环（Loop）接口和进样针座。

2.  利用仪器在线冲洗功能：

大多数好色先生TV网站APP在线观看的软件中都有“阀清洗程序”或“针清洗程序”。设置用强溶剂（如异丙醇）对进样针和阀内部进行多次、长时间的高强度冲洗。

好色先生TV免费版Kromstation软件“针清洗”程序界面，点击注射器排气即可进行进样针和阀的清洗

3.  排查连接管路：

检查泵到进样阀、进样阀到色谱柱之间的管路。如果长期使用，更换为新管路，再观察鬼峰情况。

第三步：检测器深度清洗

污染物终在此被检测，流通池或离子源本身的污染会直接产生高背景噪音和鬼峰。

请参考仪器厂家给出的清洗建议方案，谨慎进行检测器的深度清洗。

重要验证步骤：

完成所有清洗后，更换一根已知绝对干净、性能良好的色谱柱进行终测试。如果鬼峰消失，证明原色谱柱是主要污染源；如果鬼峰仍存在，则表明仪器流路或检测器仍有顽固污染，可能需要更专业的维护。

特别提醒：别把“基线漂移”误当鬼峰

在梯度洗脱中，流动相比例变化本身会引起基线上升或下降，形成类似宽峰的漂移，容易被误判为鬼峰。

真正鬼峰是尖锐的峰形；而梯度基线漂移是平滑、连续的变化，且与梯度程序时间高度相关。处理方法：    

1.  使用更高纯度的溶剂，特别是水相。  

2.  在梯度开始时增加初始比例平衡时间（如从5分钟延长至10-15分钟）。    

3.  （针对LCMS）合理设置溶剂延迟时间，避免扫描流动相初始脉冲带来的高背景。